Émergence de plasmocytes à longue durée de vie autoréactifs spléniques dans l’anémie hémolytique auto-immune à auto-anticorps chauds chez les patients en échec de rituximab

Introduction Nous avons recemment mis en evidence que l’echec du rituximab dans le PTI etait possiblement lie a l’emergence de plasmocytes a longue duree de vie (PLDV) spleniques autoreactifs (Mahevas, JCI 2013). De facon surprenante, les plasmocytes issus de rate de donneurs d’organes ou de patients non traite par le rituximab presentaient un programme transcriptionnel a plus courte duree de vie. Ceci suggerait que la depletion induite par le rituximab favorisait la differentiation et/ou l’etablissement des PLDV. Il restait neanmoins possible que cette observation soit due aux modifications du microenvironnement splenique creees par l’activation du systeme immunitaire observee dans le PTI. Pour repondre a cette question, nous avons choisi d’etudier le programme transcriptionnel des plasmocytes spleniques de patients atteints d’anemie hemolytique auto-immune (AHAI) a auto-anticorps chauds traites ou non par rituximab. Patients et methodes Nous avons analyse a l’echelle unicellulaire les plasmocytes spleniques issus de la rate de patients atteints d’AHAI a auto-anticorps chauds traites (n = 3) ou non par rituximab (n = 3). Nous avons compare les signatures genetiques de ces plasmocytes a ceux issus de rates de patients atteints de PTI traites (n = 3) ou non par rituximab (n = 3), de donneurs d’organes (n = 3) et de plasmocytes de la moelle osseuse de donneurs d’organes (n = 3). Nous avons utilise une technique de single-cell PCR (Fluidigm, Biomark), permettant de discriminer le profil transcriptionnel de proliferation des plasmablastes du profil des plasmocytes a longue duree de vie. Resultats Les plasmocytes spleniques issus de rates de patients atteints d’AHAI a auto-anticorps chauds (traites [n = 3] ou non par le rituximab [n = 3]) secretent in vitro des IgG anti-globules rouges, expliquant pour une part l’echec des traitements. Nous avons mis en evidence que les plasmocytes spleniques des patients atteints d’AHAI traites par Rituximab expriment un programme transcriptionnel de plasmocytes a longue duree de vie (PLDV) et forment une population homogene. A l’inverse, les plasmocytes matures des donneurs sains et des patients AHAI non traites par rituximab presentent un profil intermediaire, entre les plasmocytes a longue duree de vie et les plasmablastes a courte duree de vie. De facon interessante, les PLDV des patients AHAI segreguent avec les plasmocytes des patients PTI traites par le rituximab. Ils different neanmoins par le niveau d’expression de certains genes (TNAIP3, ATF3), ce qui est possiblement lie a l’impregnation cortisonique dans l’AHAI. Il existe un gradient de maturation ou les plasmocytes spleniques des patients traites par le rituximab (AHAI et PTI) se localisent entre les plasmablastes spleniques et les plasmocytes de la moelle osseuse. Les plasmocytes issus de rate de patients traites par rituximab constituent donc une population plasmocytaire splenique au programme unique. Conclusion Nos resultats confirment que la depletion lymphocytaire induite par le rituximab cree au cours de l’AHAI les conditions favorables a la differentiation des plasmocytes en plasmocytes a longue duree de vie dans la rate, expliquant pour une part l’echec du traitement. Comprendre les mecanismes lies a cette differentiation pourrait permettre d’ameliorer l’efficacite clinique de la depletion B.