Conteggio degli eritroblasti con ADVIA2120i in soggetti affetti da talassemia, drepanocitosi e nei neonati

Riassunto Premesse. La presenza di eritroblasti ( nucleated red blood cells , NRBC) nel sangue periferico (SP) di soggetti talassemici con drepanocitosi e nei neonati è indice di alterata attività eritropoietica: nei primi correla con il fabbisogno trasfusionale e nei secondi con l’indice di mortalità e le complicanze perinatali. Questo studio valuta le performance di ADVIA2120i (Siemens) per il conteggio degli NRBC nei tre gruppi sopra menzionati, accomunati da una potenziale alterata sensibilità delle emazie ai sistemi strumentali di lisi e dalla necessità di un accurato conteggio degli NRBC. Gli autori hanno anche definito e verificato una regola di validazione del conteggio degli NRBC in automazione utile per lo screening dei campioni positivi, migliorando al contempo l’appropriatezza delle revisioni microscopiche. La regola è stata definita in funzione delle performance di ADVIA2120i nei conteggi degli NRBC standard e parziali, ottenuti dai canali di analisi PEROX e BASO, dei valori dell’emoglobina (Hb) e del rapporto emazie microcitiche su ipocromiche (M/I). Metodi. In totale, 187 campioni di SP raccolto in K3EDTA (50 controlli, 26 soggetti con drepanocitosi, 55 con beta-talassemia trait o major e 56 neonati) sono stati analizzati con ADVIA2120i. I conteggi degli NRBC% standard di ADVIA2120i e quelli parziali dei canali di analisi PEROX e BASO (utilizzati nell’algoritmo di calcolo del conteggio standard: %HISTO, %RESID, %GAUSS e %BAROX) sono stati confrontati con il metodo di riferimento in microscopia ottica (MO) su striscio di SP. La concordanza tra i conteggi manuali e quelli ottenuti in automazione è stata valutata mediante la correlazione di Pearson, la regressione di Passing & Bablok e l’analisi del Bias, mentre l’accuratezza diagnostica è stata valutata con l’analisi delle curve ROC. La regola di screening proposta è stata definita in funzione del risultato del conteggio standard degli NRBC, del valore di Hb, di M/I e della valutazione delle performance analitiche dei diversi conteggi parziali/parametri strumentali. Risultati. Il confronto tra i metodi ha fornito i seguenti risultati: correlazione di Pearson: r =0,98 [intervallo di confidenza (IC) 95% 0,97–0,98; p <0,0001]; regressione Passing & Bablok: y =1,20 x +0,0 (rispettivamente con IC 95% 0,95–1,55 e 0,0–0,0); Bias: −0,907 (IC 95% −2,47–0,66). Considerando tutti i campioni esaminati, il conteggio ADVIA2120i standard ha un’AUC ( area under curve ) di 0,80, invece nei neonati e nei soggetti con drepanocitosi l’AUC è di 0,66 e nei soggetti con talassemia è di 0,73. Nel gruppo di soggetti talassemici e con drepanocitosi il parametro %BAROX presenta performance diagnostiche migliori rispetto al conteggio standard, con AUC, rispettivamente, di 0,83 e 0,76. La regola di screening proposta evidenzia una significativa concordanza con la revisione microscopica, p <0,0001 ( Pearson chi square test ). Conclusioni. Nelle tre categorie di soggetti analizzati, il conteggio in automazione con ADVIA2120i deve essere sempre riconfermato con revisione microscopica, in modo particolare nei soggetti affetti da emoglobinopatie. La performance diagnostica strumentale può essere migliorata applicando algoritmi più complessi che tengano conto anche dei parametri strumentali/conteggi parziali di calcolo degli NRBC (%BAROX), del valore di Hb e dell’indice M/I.