用2-DE和MALDI-TOF-MS筛选多发性骨髓瘤患者骨髓上清液中标志物

目的 运用2-DE和MALDI-TOF-MS研究MM患者骨髓上清液中差异表达蛋白,以寻找对MM发病机制研究和诊断或鉴别诊断的特异性蛋白质标志物.方法 收集14例MM患者、5例其他血液系统恶性肿瘤患者及5名健康对照者骨髓上清液标本.除去标本中白蛋白和免疫球蛋白G(IgG)后,用2-DE分离3组骨髓上清液标本.用ImageMaster 2D platinum 5.0图像分析软件分析比较3组2-DE凝胶图像,以差异倍数在3倍以上的蛋白点作为候选差异表达蛋白.然后,用MALDI-TOF-MS对重复性较好的候选差异表达蛋白做PMF和二级质谱鉴定.将得到的肽片段质量进行NCBInr 数据库检索,以鉴定出相应的差异表达蛋白.结果 用图像分析软件对3组骨髓上清液2-DE凝胶进行分析比较,从MM组与健康对照组中筛选出47个差异蛋白点,从MM组与疾病对照组中筛选出58个差异蛋白点.从MM组选取41个差异点进行质谱分析并鉴定,发现MM组与其他2组相比,5种高表达蛋白为免疫球蛋白J链、κ轻链、λ轻链、前病毒遗传的Gag多聚蛋白和与半抗原结合的含成熟氧(末)端的催化抗体；3种低表达蛋白为血红蛋白、结合珠蛋白(Hp2)、锌-α2-糖蛋白.这些差异蛋白部分与MM的临床表现相关,部分与MM的发生发展及临床治疗相关.结论 应用2-DE和MALDI-TOF-MS技术从MM患者骨髓上清液标本中筛出与MM疾病相关的8种差异表达蛋白,为进一步研究MM发生发展机制,完善MM诊断、鉴别诊断指标提供了参考依据.