Ergebnisse, Schlussfolgerungen und Empfehlungen aus zwei Ringversuchen zum Nachweis und zur Isolierung von Shiga (Vero) Toxin bildenden Escherichia coli (STEC) aus Hackfleischproben

Zusammenfassung Zur Qualitätssicherung wurden vom Nationalen Referenzlabor für Escherichia coli am BfR in den Jahren 2008 und 2009 zwei Ringversuche (RV2008 und RV2009) zum Nachweis und zur Isolierung von Shiga Toxin bildenden Escherichia coli (STEC) aus Hackfleischproben durchgeführt. Am RV2008 beteiligten sich 23, am RV2009 26 Einrichtungen, die sich mit der mikrobiologischen Kontrolle von Lebensmitteln befassen. Jeder Teilnehmer erhielt zur Analytik fünf Hackfleischproben mit STEC und vier ohne STEC. Im Vergleich konnte im RV2009 eine deutliche Verbesserung der Spezifität und Sensitivität beobachtet werden. Im RV2008 hatten nur vier (17,4%) Teilnehmer alle STEC-positiven Proben identifiziert, im RV2009 waren es 14 (53,8%). Die Zahl der falsch-positiven Befunde sank von 17,4% (RV2008) auf 3,8% (RV2009). Die Ermittlung des Konkordanz odds ratio Wertes zeigte signifikante Unterschiede zwischen den teilnehmenden Laboren. Für die Analyse verwendeten die Teilnehmer überwiegend Methoden in Anlehnung an die Amtlichen Untersuchungsverfahren nach § 64 LFGB, wie Stx-ELISA und Kolonie-Immunoblot, oder stx -PCR und Kolonie-DNA-Hybridisierung. Die auffällig niedrige Sensitivität bei Einsatz von Stx-ELISA im RV2008 konnte auf ein kommerzielles Produkt (Novitek Veterinär), das einige Varianten von Stx1 und Stx2 nicht erkannte, zurückgeführt werden. Es wird empfohlen, nur von unabhängiger Seite evaluierte Nachweisverfahren einzusetzen, um die Spezifität und Sensitivität des Testverfahrens zu gewährleisten. Real-Time stx -PCR als neue Methode wurde verstärkt eingesetzt und erwies sich als viel versprechend. Der Nachweis von enterohämorrhagischen E. coli (EHEC) O157:[H7] als häufigster Erreger von Hämorrhagischer Colitis (HC) und Hämolytisch Urämischem Syndrom (HUS) sollte durch Einführung spezifischer Verfahren (ISO16654) verbessert werden, da nur zwei von 26 Teilnehmern diesen Keim aus einer Hackfleischprobe, die zwei STEC Stämme enthielt, isoliert hatten.