环杷明对马兜铃酸诱导的肾上皮细胞表型转化及 Hedgehog 通路的影响

目的：探讨环杷明干预Hedgehog（HH）信号对马兜铃酸（AA）致肾小管上皮细胞表型转化和基质累积的影响。方法：根据干预措施将体外培养的大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E分为溶剂对照组、AA损伤组（分别用终浓度为1、5和10 mg／L的AA处理细胞）和环杷明干预组（10 mg／L AA基础上加入1、5和10μmol／L环杷明）。细胞培养24 h后，用real-time PCR检测HH信号关键分子Ptch1和Smo、表型转化相关分子α-SMA和E-cad-herin、ZO-1、BMP-7和基质成分I型和III型胶原mRNA的表达；ELISA法检测Shh和TGF-β1的含量；细胞免疫荧光染色检测Ptch1、Smo、E-cadherin、α-SMA和III型胶原蛋白表达。结果：AA不仅增加了TGF-β1、α-SMA和III型胶原的表达，降低了E-cadherin和ZO-1的表达，而且诱导了Shh和Smo mRNA表达的升高和Ptch1 mRNA表达的下降，提示AA促进小管上皮细胞表型转化和胶原累积，同时也激活了HH信号通路。环杷明干预AA作用后，Smo mRNA或蛋白表达下调，Ptch1 mRNA表达升高，这说明环杷明抑制了AA诱导的HH信号通路的活化。此外，环杷明也降低TGF-β1、α-SMA、I型和III型胶原的表达，提高BMP-7、ZO-1和E-cadherin的表达，这提示环杷明抑制了AA所致的上皮细胞的表型转化和基质累积。结论：环杷明可抑制AA所致的肾小管上皮细胞表型转化和基质累积，可能是通过靶向抑制HH信号的活化来实现的。