鱼腥藻铁调蛋白基因（alr0957）表达和Fe3＋对藻生长的影响

根据CyanoBase提供的鱼腥藻PCC7120 FurC基因（ alr0957）序列信息设计特异性引物，用降落PCR法从染色体DNA中扩增得约450 bp目的片段．运用TA克隆将其连接到pMD18-T载体上，经筛选测序获得阳性重组质粒．再经过双酶切、纯化FurC基因，连接原核表达载体pET-28a（＋），并转化表达菌株BL21和IPTG诱导表达．经测序鉴定的阳性菌株中的FurC，运用SDS-PAGE检测重组蛋白，并利用镍柱层析法纯化目的蛋白．由藻细胞密度、叶绿素a含量、可溶性糖含量等改变探讨不同Fe3＋浓度对藻类生长的影响．结果表明：在37℃经1 mmol/L IPTG诱导18 h，成功表达了分子量约为19000的融合蛋白．小于0．5mg/L Fe3＋促进藻生长，大于0．9 mg/L Fe3＋抑制藻生长，最适藻生长Fe3＋浓度为0．5～0．9 mg/L．