儿童孤独症相关基因NRXN1β启动子功能分析

Neurexins 是神经特异性突触蛋白，Neurexin1β结构的异常与孤独症密切相关。为分析孤独症相关基因NRXN1β最小启动子和调节基因转录的功能元件，本文构建了含NRXN1β基因上游调控区不同区域的荧光素酶报告基因质粒，转染HEK293细胞后，利用检测双荧光素酶报告基因的转录活性以确定NRXN1β基因最小启动子区，进而筛选出相应的显著增强或抑制报告基因活性的功能区；同时，为鉴定顺式作用元件，利用基因定点突变技术对基因功能区内和临近DNA序列进行连续的碱基突变；最后，采用转录因子预测工具对启动子功能区内的转录调控元件进行分析。结果首次发现NRXN1β最小启动子区位于?88~+156 bp，?88~?73 bp和+156~+149 bp可增强启动子活性，+229~+419 bp可抑制启动子活性，且?84~?63 bp为能够显著性增强启动子活性的顺式作用元件，该区域可能存在DBP(Albumin D-site-binding protein，DBP)和ABF1(Autonomously replicating sequence-binding factor 1，ABF1)两个转录因子结合位点。