RNA干扰沉默Sp1基因抑制大肠癌SW620细胞的恶性增生

目的 采用RNA干扰技术沉默大肠癌SW620细胞转录因子特化蛋白1(Sp1)的表达,观察其对细胞增生的影响.方法 构建靶向人Sp1基因的干扰载体(pGenesil-1-Sp1),脂质体介导转染SW620细胞,荧光倒置显微镜下观察转染效率,应用实时荧光定量PCR和Western blotting检测其对Sp1mRNA及蛋白质水平的影响,MTT法检测SW620细胞增生活性的改变.结果 成功构建针对Sp1的干扰载体,转染后能够有效抑制大肠癌SW620细胞中Sp1 mRNA和蛋白的表达,且在转染48 h抑制作用最强.其对Sp1 mRNA和蛋白质抑制率分别为68.47%和73.82%.与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).MTT实验显示,下调Sp1表达可显著抑制大肠癌SW620细胞的体外增生能力.结论 Sp1基因沉默能够抑制人大肠癌SW620细胞的增生,为以Sp1为靶点的大肠癌基因治疗提供新的思路和手段.