华蟾酥毒基诱导人骨肉瘤细胞 U-2OS 凋亡的实验研究

目的：观察华蟾酥毒基对人骨肉瘤细胞 U-2OS 增殖和凋亡的影响，从而探讨华蟾酥毒基诱导骨肉瘤凋亡的可能机制。方法：应用四甲基偶氮唑蓝比色法检测华蟾酥毒基对人骨肉瘤细胞 U-2OS 增殖的影响；应用流式细胞术检测华蟾酥毒基及华蟾酥毒基联合泛 Caspase 抑制剂 Z-VAD-FMK 对人骨肉瘤细胞 U-2OS 细胞凋亡的影响；应用蛋白质印迹法检测华蟾酥毒基对凋亡通路相关蛋白表达的影响。结果：四甲基偶氮唑蓝比色法实验结果表明，华蟾酥毒基以时间和浓度依赖的方式抑制 U-2OS 细胞生长。流式细胞术结果显示，100 nM华蟾酥毒基干预后，U-2OS 细胞凋亡率为（46．87±11．23）％，但当华蟾酥毒基与泛 Caspase 抑制剂 Z-VAD-FMK 共同干预后，细胞凋亡率仅为（2．34±0．98）％，与空白对照组及华蟾酥毒基联合 Z-VAD-FMK 组相比，华蟾酥毒基能显著提高细胞凋亡率（P ＜0．01）。蛋白质印迹法结果显示，华蟾酥毒基能够显著提高促凋亡蛋白Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-8、Cleaved Caspase-9的表达。结论：华蟾酥毒基对人骨肉瘤细胞 U-2OS 的生长有显著抑制作用，并能够促使肿瘤细胞凋亡，其作用机制可能与激活 Caspase 依赖的凋亡途径有关。