15-HETE参与的脑缺血再灌注损伤中p-ERK1/2表达变化的研究

目的:通过应用15-脂氧化酶(15-Lipoxygenase,15-LOX)抑制剂去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiaretic acid,NDGA)抑制15-羟基-二十碳四烯酸(15-hydroxyeicosatetraenoic acid,15-HETE)的生成,观察缺血再灌注损伤中大鼠脑组织磷酸化细胞外信号调节酶(phosphor-extracellular signal-regulated kinase,p-ERK1/2)表达的变化,探讨p-ERK1/2在15-HETE参与的脑缺血再灌注损伤中的作用及其表达变化.方法:应用大脑中动脉线栓栓塞法(MCAO)制作大鼠脑梗死2小时再灌注模型.将大鼠随机分为三组:假手术组(sham组)、DMSO对照组、NDGA处理组.后两组再根据不同的灌注时间分为三个亚组:再灌注1小时组、再灌注6小时组、再灌注24小时组.采用TTC染色法检测再灌注24小时大鼠脑梗死体积;免疫印迹(Western blot)法测定梗死后再灌注不同时间点梗死核心区和梗死周围区的p-ERK1/2的表达.结果:假手术组仅有少量p-ERK1/2的表达.DMSO对照组梗死核心区p-ERK1/2的表达从梗死再灌注后1小时即开始逐渐升高(1.43± 0.06),6小时达高峰(2.02±0.14),24小时有所下降(1.16±0.21),与假手术组(0.62± 0.08)比较P值均＜0.01;梗死周围区p-ERK1/2表现出相同的变化趋势.与DMSO对照组比较,NDGA处理组大鼠脑梗死体积显著减小(20.10± 0.12％vs 17.24± 0.16％,P=0.009,P ＜0.05),各时间点p-ERK1/2的表达均下降.与梗死核心区相比较,梗死周围区24小时仍可检测到较高含量的p-ERK1/2(1.16± 0.21 vs 1.86±0.14),但梗死核心区表达相对较少.结论:脑缺血再灌注损伤中,p-ERK 1/2的表达增加,说明p-ERK1/2参与其中;应用NDGA后,p-ERK1/2的表达降低,脑梗死体积减小,证实p-ERK1/2参与了15-HETE介导的脑缺血再灌注损伤,并在此过程中可能参与了细胞的凋亡.