一株同时携带质粒介导KPC-2、DHA-1基因对碳青霉烯类药物耐药的产气肠杆菌

目的研究一株临床分离的碳青霉烯类药物耐药产气肠杆菌的耐药机制和耐药基因传播机制。方法采用琼脂稀释法检测菌株对抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC），采用质粒接合试验、质粒提取、DNA分子杂交、等电聚焦电泳（IEF）、聚合酶链反应（PCR）、DNA测序和外膜蛋白分析研究菌株的耐药基因及其传递机制。结果IEF显示临床分离的产气肠杆菌株含有3条β内酰胺酶条带，等电点（pI）分别为5．4、6．7和7．8。PCR扩增及测序结果表明它们分别为TEM1（pI5.4）、KPC2（pI6．7）、DHA1（pI7．8）β内酰胺酶。接合菌含有2条β内酰胺酶条带，pI为6．7和7．8。接合试验、质粒提取和分子杂交试验结果显示KPC2和DHA1基因定位于同一个约56kb大小的质粒上。与临床野生产气肠杆菌株相比，外膜蛋白电泳分析显示耐药分离株缺失41000外膜蛋白。结论产气肠杆菌分离株对碳青霉烯类抗菌药物耐药可能由A类2f组KPC2酶介导，DHA1酶合并外膜蛋白缺失也可能与碳青霉烯类药物耐药机制形成有关。