Comparación de las pruebas: reacción en cadena de la polimerasa (PCR), serología y hemocultivo con respecto a sensibilidad y especificidad, para la detección de Brucella spp en muestras humanas

María G. Álvarez-Ojeda, Carolina Saldaña-Fuentes, María Romelia Ballesteros-Elizondo, Irma Olivia Martı́nez-Vázquez,Ahidé López-Merino,Evangelina Briones Lara,Alberto Morales-Loredo

Gaceta Medica De Mexico(2015)

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摘要
espanolObjetivo: Comparar la prueba PCR, para la deteccion de Brucella spp, en muestras de sangre humana, con respecto a rosa de Bengala (RB), aglutinacion estandar en placa (MAP), 2-mercaptoetanol (2-ME) y hemocultivo establecidas en la NOM 022-SS2-1994, en cuanto a sensibilidad y especificidad. Material y metodos: En el ano 2005, se muestreo a 92 personas de los municipios de Anahuac y Sabinas Hidalgo, Nuevo Leon (N.L.), en donde se registro un brote de brucelosis en humanos. A partir de sangre completa, se realizo el hemocultivo y se obtuvo ADN. Se amplifico un fragmento de 223 pares de bases de la secuencia que codifica para una proteina de 31 kDa especifica del genero Brucella. Resultados: La PCR detecto 23 muestras positivas. La sensibilidad y especificidad de PCR comparada con RB fue de 44.68 y 95.56%, respectivamente. Comparada con MAP fue de 51.61 y 88.52%, mientras que con 2-ME fue de 53.57 y 87.50%. Cuando se comparo con el aislamiento bacteriano, se obtuvo un 100.0% de sensibilidad y 80.23% de especificidad considerando tanto personas positivas como negativas para serologia. Conclusiones: La prueba de PCR puede ser una herramienta alternativa al cultivo bacteriano, en el diagnostico de brucelosis humana. EnglishObjective: The aim of this study was to evaluate the sensitivity and specificity of polymerase chain reaction for detection of Brucella spp in human blood samples compared with the serological tests and blood culture. Material and Methods: In 2005, a total of 92 people were sampled from the towns of Anahuac and Sabinas Hidalgo, Nuevo Leon, where an outbreak of human cases had taken place in the same year as this study. The sera collected were analyzed by serological tests according to the NOM 022-SS2-1994. DNA was obtained using CTAB extraction method and it was used to amplify a fragment of 223 bp of the coding sequence for a protein of 31 kDa present in all Brucella species. Results: The polymerase chain reaction test detected 23 positive samples. The sensitivity and specificity compared with RB was 44.68 and 95.56%, respectively. Compared with mouse antibody production, it was 51.61 and 88.52%, and 2-mercaptoethanol was 53.57 and 87.50%. When isolation (positives cultures) was compared with polymerase chain reaction, we obtained 100.0% sensitivity and 80.23% specificity, taking into account people with positive and negative serology. Conclusions: The polymerase chain reaction test can be an alternative tool to bacterial culture in human brucellosis diagnosis. (Gac Med Mex. 2015;151:620-7) Corresponding author: Alberto Morales-Loredo., amorales@lcrn.mx
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