Wnt3诱导小鼠肝前体细胞上皮-间质转化

目的 探讨wnt3对小鼠肝前体细胞(14-19)发生上皮-间质转化的影响.方法 分别将空载体Ad-GFP和表达wnt3的腺病毒Ad-GFP-wnt3转入小鼠肝前体细胞中,显微镜下观察细胞形态变化.细胞划痕实验和细胞迁移实验观察14-19细胞迁移能力.实时荧光定量PCR和蛋白质印迹分析分别检测14-19细胞中上皮标记物和间质标记物的表达改变.结果 显微镜下可见高表达wnt3的14-19细胞由不规则多边形变为长梭形.细胞划痕实验和细胞迁移实验结果显示,高表达wnt3的14-19细胞迁移能力明显提高,与空载体转染细胞相比差异具有统计学意义(P＜0.01).实时荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示,间质标记物N-cadherin、vimentin和twist1的mRNA和蛋白水平表达上调,相反上皮标记物E-cadherin的mRNA水平和蛋白水平表达下调,与空载体转染细胞相比差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 Wnt3能够促使小鼠肝前体细胞发生上皮-间质转化,提示其可能参与了肝纤维化的发展进程.