洋金花总碱对TGF-β1诱导的人肺腺癌细胞A549细胞EMT的影响

目的 探讨洋金花总碱对人肺腺癌细胞株A549在体外经转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导后发生上皮细胞间质化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用.方法 将体外培养的A549细胞随机分为5组:空白对照组、TGF-β1组及低、中、高浓度药物组,分别作用24、48、72 h时,观察各组A549细胞形态变化,通过蛋白免疫印迹(Western blot)及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测各组A549细胞人细胞角蛋白19(CK-19)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 TGF-β1组的细胞形态逐渐由鹅卵石状向梭形改变;低、中、高浓度药物组形态与TGF-β1组相似;个浓度药物组细胞形态间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).Western blot结果显示:与空白对照组比较,TGF-β1组CK-19表达下调,α-SMA表达上调(P＜0.01);与TGF-β1组比较,低、中、高浓度药物组CK-19表达上调(P＜0.01),α-SMA表达有所抑制(P＜0.01);3个浓度药物组间比较,72 h时的高浓度药物组CK-19表达上调(P＜0.01),α-SMA表达抑制(P＜0.01).Real-time PCR结果显示:与TGF-β1组比较,3个浓度药物组细胞CK-19 mRNA表达增多;α-SMA mRNA表达减少(P＜0.01).结论 洋金花总碱对TGF-β1诱导的肺腺癌细胞A549 EMT形态改变无明显影响,能一定程度上逆转A549细胞EMT过程中特征性标记物CK-19及α-SMA的表达,使上皮标志物CK-19表达增多,间质细胞标志物α-SMA表达减少,且在作用72 h时的高浓度药物组最为明显,并呈浓度依赖性和时间依赖性.