2010-2013年贵州省12株布鲁菌分离株分子分型研究

目的：对2010—2013年贵州省的布鲁菌株进行鉴定和分型，了解贵州省人群间和动物间布鲁菌的流行菌型。方法于2010—2013年，在贵州省分离了12株布鲁菌，其中来自山羊血液来源4株（GZLL3、GZLL4、GZLL11和SH2株），布鲁菌病患者血液8株（SH4、GZZY、GZSQ、GZZA、BR13001、BR13004、BR13005和BR13006株）。采用传统布鲁菌分离鉴定方法、PCR和PFGE技术，对12株布鲁菌疑似菌株进行鉴定和分型，采用布鲁菌属特异性基因BCSP 31作为定属基因进行扩增；以布鲁菌属IS711插入序列为基础建立的AMOS-PCR的方法及参数进行布鲁菌种（型）的鉴定，应用PFGE技术对山羊和患者来源菌株进行比较分析。结果传统方法和PCR方法检测结果显示，12株布鲁菌可疑菌株均为羊种3型布鲁菌。BCSP31-PCR鉴定结果显示，12株布鲁菌株和阳性对照菌株DNA经扩增后均出现223 bp的特异性DNA扩增条带，而阴性对照未出现扩增条带。AMOS-PCR鉴定结果显示，12株布鲁菌株经扩增后均出现731 bp的特异性DNA扩增条带，而M5、S2和A19菌株分别出现731、498和275 bp的DNA条带，阴性对照未出现扩增条带。PFGE分析显示，分离自羊和患者菌株经Xba1酶切产生的PFGE带型一致。结论贵州省人群间和动物间（山羊）布鲁菌流行菌型均为羊种3型，羊为贵州省布鲁菌病主要动物传染源。