骨髓间充质干细胞在小肠移植大鼠体内的定植研究

目的 观察骨髓间充质干细胞(MSC)在异位小肠移植大鼠体内的定植情况.方法 骨髓细胞取自1月龄的雄性Lewis大鼠,通过密度梯度离心法结合贴壁法分离和培养骨髓MSC;通过流式细胞术对MSC表面抗原(CD29、CD90、CD34和CD45)进行鉴定;应用终浓度为5μmol/L的5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE)对生长良好的第3代MSC进行标记.以成年雄性近交系F344大鼠作为供体、成年雄性Lewis大鼠作为受体,建立大鼠异位小肠移植模型.术后经阴茎背静脉将CFSE标记的MSC注入受体体内,术后第7天收集冰冻病理标本,在荧光显微镜下观察MSC的定位情况.结果 成功分离培养出骨骼MSC,其表面抗原CD29、CD90、CD34和CD45的平均阳性表达率分别为96.48％、99.77％、2.41％和1.39％.CFSE能有效标记MSC,术后7d在移植小肠的间质、脾脏和胸腺可观察到大量绿色荧光,自体小肠组织仅见微量荧光,而心、肝和肺组织基本未见绿色荧光.结论 骨骼MSC能成功定植于大鼠小肠移植术后的移植小肠中.