Notch信号促进核因子κB受体活化因子配体诱导的破骨细胞分化的体外研究

目的：探讨Notch信号抑制对核因子κB受体活化因子配体（RANKL）诱导的小鼠RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响。方法建立RANKL诱导的小鼠RAW264.7细胞体外分化模型，实时定量聚合酶链反应（real-time PCR）检测Notch信号成分（Notch1、Notch2、Delta1、Jagged1）、下游靶基因Hes1以及破骨细胞标志基因抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）和Cathepsin K在诱导前后mRNA的表达。在诱导体系中加入不同浓度的γ分泌酶抑制剂（GSI），抑制Notch受体的表达，TRAP染色检测破骨细胞分化的变化情况。结果50 ng·mL-1 RANKL诱导小鼠RAW264.7细胞3 d，Notch1、Notch2、Delta1、Jagged1及Hes1的mRNA表达均有不同程度的提高，其中以Notch2、Jagged1增高最明显；破骨细胞标志基因表达显著增高。在RANKL诱导的同时加入不同浓度GSI，抑制Notch的表达，可致Notch下游靶基因Hes1表达下降，同时TRAP阳性细胞计数显著减少，且呈剂量依赖性。结论 Notch信号可促进RANKL诱导的RAW264.7细胞向破骨细胞分化。