苦杏仁苷联合羟基红花黄色素A对IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞的影响

本文探讨了中药单体苦杏仁苷(amygdalin)联合羟基红花黄色素A(HSYA)对IL-1β诱导退变的大鼠椎间盘软骨终板细胞的影响,寻找可能的作用机制.从1月龄SD大鼠椎间盘中分离软骨终板并培养软骨终板细胞,经鉴定后选择第3代软骨终板细胞用于实验,随机分为正常组、诱导组、苦杏仁苷组、羟基红花黄色素A组和联合用药组.采用CCK-8法检测细胞增殖,流式检测细胞凋亡,Real-time PCR (RT-PCR)检测Aggrecan、Col2 α1、Col10 α1、MMP-13、IL-1βmRNA的表达,细胞免疫荧光检测Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原的表达.结果表明,与正常组比较,IL-1β诱导组软骨终板细胞增殖降低,细胞凋亡增加(P＜0.05),下调Aggrecan、Co1 2α1 mRNA的表达,上调CoⅠ 10 α1、MMP-13、IL-1β mRNA的表达(P＜0.05);同时Ⅱ型胶原蛋白的表达降低、Ⅹ型胶原蛋白的表达升高.与IL-1β诱导组比较,苦杏仁苷组、羟基红花黄色素A组和联合用药组均能在抑制软骨终板细胞凋亡的同时促进软骨终板细胞的增殖(P＜0.05),上调Aggrecan、Col 2 α1 mRNA的表达的同时下调Col 10 α1、MMP-13、IL-1β mRNA的表达(P＜0.05);促进Ⅱ型胶原蛋白的表达增强、Ⅹ型胶原蛋白的表达降低.联合用药组作用的效果明显优于苦杏仁苷组、羟基红花黄色素A组(P＜0.05).苦杏仁苷联合羟基红花黄色素A可抑制IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板软骨细胞发生退变,优于苦杏仁苷、羟基红花黄色素A单独用药.