pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2真核表达载体的构建与鉴定

目的：构建pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2多基因重组表达载体，并对其进行初步鉴定。方法根据重组体pcDNA3-p30-ROP2酶切位点和乙型肝炎表面抗原（HBsAg）基因序列等因素设计合成引物，扩增HBsAg目的基因片段，再应用酶切、连接等分子生物学技术将HBsAg目的基因克隆至pcDNA3-p30-ROP2表达载体中。应用聚合酶链反应（PCR）初筛，再采用酶切、测序等技术对构建的重组表达载体pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2进行鉴定。结果 PCR扩增出HBsAg基因片段，构建了pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2多基因真核表达载体。PCR与酶切结果显示，该基因片段大小均与理论值相符；测序结果显示该重组表达载体包含了p30-ROP2和HBsAg目的基因的完整序列。结论成功构建了多基因重组表达载体pcDNA3-HBsAg-p30-ROP2，为进一步研究多基因核酸疫苗奠定了基础。