红树林淡紫拟青霉EPS提取物体外抗HSV-1机制研究

目的 探讨红树林淡紫拟青霉胞外多糖(extracellular polysaccharides,EPS)提取物体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)感染的机制. 方法 以Vero细胞为病毒感染靶细胞,以不同浓度EPS提取物作用于HSV-1感染过程的各个阶段,MTT法测定提取物对Vero细胞的毒性作用和对HSV-1的直接灭活作用及对病毒吸附和生物合成的影响;采用RT-PCR检测该提取物对病毒gD基因US6和DNA聚合酶基因UL30表达的影响. 结果 EPS提取物对Vero细胞无促进增殖作用,其对Vero细胞的半数有毒浓度(CC50)为1 300.17 μg/ml,浓度在800 μg/ml以下时细胞存活率达90％以上;在25～800 μg/ml浓度范围内该提取物可抑制HSV-1吸附和生物合成,并表现出一定量效关系;浓度为800μg/ml时抑制率最高,分别为39.5％和59.7％,与病毒对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01),但并不能达到完全抑制.未发现该提取物对HSV-1有直接灭活作用.RT-PCR显示该提取物可干扰病毒US6和UL30基因转录,灰度扫描分析US6 mRNA丰度与病毒对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05);UL30mRNA丰度与病毒对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01). 结论 EPS提取物对Vero细胞毒性较小,使用安全.该提取物具有一定的抗病毒作用,可抑制HSV-1吸附和生物合成,还可抑制US6和UL30基因转录.