蒲葵子提取物对膀胱癌细胞增殖凋亡的影响及其相关机制

目的:探讨蒲葵子提取物对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响及其相关机制。方法:将T24细胞分别用含蒲葵子提取物且终浓度分别为0、25、50、100 mg/L的培养液培养，分别记为对照组和蒲葵子低、中、高剂量组。用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞存活率；克隆形成实验检测细胞克隆形成数量；流式细胞术检测细胞凋亡；蛋白质印迹法检测Caspase 3、脾酪氨酸激酶(Syk)、Ki-67表达。将Syk过表达载体质粒及其阴性对照分别转染至T24细胞中，转染后再分别用100 mg/L蒲葵子提取物处理，按上述方法检测细胞存活率、克隆形成数量及细胞凋亡率。用不同浓度蒲葵子提取物处理裸鼠膀胱癌模型，观察裸鼠一般情况和肿瘤生长情况；免疫组化染色检测膀胱癌组织Caspase 3、Syk、Ki-67蛋白表达。结果:蒲葵子低、中、高剂量组较对照组T24细胞存活率显著降低[(88.50±3.65)%、(70.58±2.47)%、(48.90±2.37)%与(98.25±4.26)%]，克隆形成数量显著减少[(101.33±3.40)、(84.00±2.94)、(60.00±2.16)个与(121.33±4.64)个]，细胞凋亡率显著升高[(11.45±0.59)%、(17.71±0.64)%、(21.33±0.83)%与(7.86±0.43)%], Ki-67蛋白表达水平显著降低，Caspase3、Syk蛋白表达水平显著升高，且均呈浓度依赖性(均 P<0.05)。pcDNA3.1-Syk组较pcDNA3.1组细胞存活率显著降低[(63.87±2.53)%与(98.45±3.54)% ]，克隆形成数量显著减少[(74.33±2.87)个与(121.33±3.68)个]，细胞凋亡率显著升高[(18.39±0.63)%与(7.89±0.45)% ](均 P<0.05)。pcDNA3.1-Syk+蒲葵子高剂量组较pcDNA3.1+蒲葵子高剂量组的细胞存活率显著降低[(29.80±1.63)%与(49.33±2.76)% ]，克隆形成数量显著减少[(33.00±2.94)个与(59.67±3.30)个]，细胞凋亡率显著升高[(26.93±0.68)%与(21.25±0.78)% ](均 P<0.05)。膀胱癌模型裸鼠实验结果显示，对照组和蒲葵子低、中、高剂量组裸鼠移植瘤体积分别为(1 209.75±64.37)、(1 006.31±40.49)、(530.58±42.87)、(267.58±16.73)mm 3，移植瘤重量分别为(0.36±0.08)、(0.30±0.04)、(0.26±0.03)、(0.18±0.06)g，组间两两比较差异均有统计学意义( P<0.05)。免疫组化染色检查结果显示，与对照组相比，蒲葵子中、高剂量组膀胱癌裸鼠中Sky和Caspase3表达增加，Ki-67表达降低。 结论:蒲葵子提取物可通过上调Syk表达抑制膀胱癌细胞增殖，促进细胞凋亡。