桑疫病病原拮抗菌的分离、鉴定及发酵条件优化

[目的]从健康桑树内生菌中分离获得对桑疫病病原菌(Pseudomonas syringae pv.mori)具有显著拮抗作用的菌株,优化其产生抑菌活性物质的发酵条件,为其生防利用奠定基础.[方法]从严格表面消毒的桑树根茎中分离内生菌,采用平板划线法纯化内生菌,用抑菌圈法筛选拮抗菌;根据菌株的形态与培养特征、生理生化特性、16S rDNA序列分析对其进行鉴定.通过单因素试验和正交设计试验优化培养基组分及发酵条件.[结果]从健康桑树中分离获得内生菌77株,其中,编号为SWg2的菌株对桑疫病病原菌具有强而稳定的抑制作用.菌株SWg2的形态与培养特征、生理生化特性和泛菌属(Pantoea sp.)相符,而16S rDNA序列分析结果显示它与成团泛菌(P.agglomerans)的亲缘关系接近.研究表明其最佳发酵配方和培养条件为:甘油(2.00％)、硝酸铵(2.00％)、KH2PO4 (0.10％)和MgSO4 ·7H2O(0.15％),起始pH为7.5,装瓶量20 mL/100 mL,最适培养温度为28℃,转速为170 r/min,种子液接种量为4％,摇瓶培养5d.[结论]经鉴定,对桑疫病病原具拮抗作用的桑树内生菌SWg2为成团泛菌(P.agglomerans),命名为成团泛菌SWg2.对其发酵条件进行优化后对桑疫病病原菌显示出更强的拮抗作用.