miR-378靶向胰岛素样生长因子1类受体抑制肝癌细胞生长
Zhonghua gan zang bing za zhi = Zhonghua ganzangbing zazhi = Chinese journal of hepatology(2013)
Abstract
目的 探讨miR-378对肝癌细胞生长增殖的影响及其机制. 方法 用miR-378过表达慢病毒感染肝癌细胞株HepG2和稳定表达HBV的肝癌细胞株HepG2.2.15,采用四甲基偶氮唑盐和克隆形成实验研究其在肝癌发生和发展中的作用.生物信息学方法预测miR-378的靶基因,荧光素酶报告实验验证靶基因,并用实时定量PCR方法和Western blot方法研究上调miR-378表达对其靶基因表达的影响,分析miR-378在肝癌中作用的机制.采用SPSS13.0软件进行统计分析,两组间比较采用t检验. 结果 与空载体感染组比较,miR-378过表达慢病毒感染组肝癌细胞的增殖活性降低和克隆形成减少,差异有统计学意义(P< 0.01或P< 0.05).用生物信息学方法预测胰岛素样生长因子1类受体(IGF1R)为miR-378的靶基因,荧光素酶报告实验结果显示,与对照组比,miR-378与IGF1R 3 '-UTR共转染组荧光酶活性下降了41.8%,差异有统计学意义(P<0.01).上调肝癌细胞中miR-378表达后,IGF1R mRNA表达与对照组差异无统计学意义(P>0.05),而IGF1R蛋白表达水平显著降低(P<0.01).结论 miR-378可抑制肝癌细胞的增殖和克隆形成,起抑癌基因的作用,其作用是通过抑制其下游靶基因IGF1R发挥的.HBV导致的miR-378下调表达可能是HBV相关性肝癌发生和发展的分子机制之一.
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Tumor Microenvironment,Cancer Cell Metabolism
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