内耳免疫反应中细胞凋亡的研究

目的探讨内耳免疫反应过程是否引起细胞凋亡以及Fas和FasL、Bcl-2和Bax的表达情况.方法选用雌性白色豚鼠16只,随机分为实验组和对照组各8只,以钥孔NFDAA血蓝蛋白全身免疫后,实验组以相同抗原进行内耳免疫,对照组内耳注射等量的磷酸盐缓冲生理盐水,在内耳免疫7 d后处死动物,取内耳免疫侧耳蜗做石蜡切片.通过电镜和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)检测内耳凋亡细胞,免疫组化检测内耳Fas和FasL以及Bcl-2和Bax的表达. 结果透射电镜观察发现实验组术后7 d内耳外毛细胞、血管纹细胞及螺旋神经节细胞都出现了凋亡细胞的特征性改变,而对照组未发现具有上述特征的细胞.实验组内耳Corti器毛细胞,血管纹的缘细胞和螺旋神经节细胞存在TUNEL染色阳性细胞,TUNEL染色阳性细胞具有凋亡细胞的典型形态学特征,对照组内耳的任何结构中都没发现TUNEL染色阳性细胞.免疫组化染色实验组Corti器、螺旋神经节细胞、血管纹和螺旋韧带Fas和FasL蛋白表达阳性,而对照组只有螺旋神经节细胞和血管纹有较弱的Fas蛋白表达, FasL蛋白表达阴性. 实验组Corti器、螺旋神经节细胞、侧壁Bcl-2蛋白表达阴性,对照组的Corti器、侧壁和螺旋神经节细胞Bcl-2蛋白表达阳性.实验组Corti器、侧壁和螺旋神经节细胞Bax蛋白表达阳性,对照组只有螺旋神经节细胞Bax蛋白表达弱阳性,Corti器、侧壁表达阴性.结论内耳免疫反应可诱导细胞凋亡发生, Fas-FasL是此过程的信号转导途径之一,Bcl-2和Bax蛋白在其中起了重要调节作用.