人Nanog基因的克隆及其在COS-7L细胞中的表达
Xi bao yu fen zi mian yi xue za zhi = Chinese journal of cellular and molecular immunology（2004）
摘要
目的:克隆人Nanog基因,构建其真核表达载体,并观察其在哺乳动物细胞COS-7L中的表达.方法:利用HE293细胞的人基因组DNA为模板,以LA-PCR技术,扩增Nango的基因,定向克隆到带Flag标签的pCMV载体中,测序后,挑选序列正确的真核表达质粒pFlag-Nanog转染COS-7L细胞.用抗Flag标签的抗体,进行Western blot和间接免疫荧光染色法检测Nango蛋白的表达.结果:从人基因组DNA中克隆到序列正确的Nanog全长编码序列.所构建的Nanog质粒在COS-7L细胞中获得高效表达.结论:人Nanog基因的克隆、真核表达载体的构建及在COS-7L中的表达均获得成功,为进一步研究其功能,尤其是探讨其在神经干细胞中的作用奠定了基础.
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关键词
human nanog gene,cloning,cells
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