重度子痫前期患者血清对人脐静脉血管内皮细胞的氧化性损伤研究

目的 探讨重度子痫前期患者血清对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)造成的氧化性损伤.方法 (1)HUVEC进行如下分组处理:20％健康孕妇血清刺激(正常血清组)、20％重度子痫前期患者血清刺激(PE组)、20％重度子痫前期患者血清+3×103 U/ml过氧化氢酶共同刺激(PE+Cat组),并设置空白对照组,继续培养后,透射电镜观察细胞损伤情况,并用流式细胞仪检测凋亡相关蛋白APO2.7的表达情况.(2)激光共聚焦显微镜下,对HUVEC进行实时扫描的同时给予如下分组处理:正常血清组、PE组、PE+ Cat组、加入100 μmol/L H2O2(阳性对照组),分别检测胞内活性氧簇(ROS)、Ca2及线粒体膜电位水平.结果 (1)透射电镜下,PE组HUVEC的损伤明显,出现细胞膜脱落,并包裹细胞质形成自噬体,线粒体水肿,核固缩；但PE+ Cat组的HUVEC虽然线粒体有轻度水肿表现,但嵴清晰可见,细胞核形态基本正常,细胞损伤明显改善.PE组的HUVEC中APO2.7的表达率为(37.8±1.1)％,与空白对照组[(13.4±1.1)％]、正常血清组[(13.5±1.5)％]比较显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.01)；而PE+ Cat组APO2.7表达率为(19.2±1.6)％,显著降低,与PE组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)激光共聚焦显微镜下PE组的HUVEC胞内ROS、Ca2荧光强度变化幅度分别为12.0±1.3、4.1±0.7,而正常血清组分别为1.1±0.4、0.6±0.4,PE+Cat组分别为1.5±0.5、0.9±0.5,PE组分别与正常血清组、PE+ Cat组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).PE组的HUVEC线粒体膜电位荧光强度在扫描120 s时有显著降低,而正常血清组、PE+Cat组变化不明显.结论 重度子痫前期患者血清通过促进ROS生成,增强Ca2超载水平和降低线粒体膜电位对血管内皮细胞造成氧化性损伤.