弓形虫多表位基因植物表达载体的构建

Xiao-hong Zhou,Xiao-guang Chen,Xiao-dong Zhang,Pei-liang Yang,Jia-fei Xi,Jian-jun Hu,Ya-nan Wang,Lin Li,Shu-man Shen

Zhongguo ji sheng chong xue yu ji sheng chong bing za zhi = Chinese journal of parasitology & parasitic diseases（2003）

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摘要

目的构建弓形虫多表位基因(TGMG)植物表达载体.方法①将TGMG亚克隆入pBAC55构建中间载体pB35MG,再将其中E35S/TGMG/NOS3'结构单元亚克隆人pCAMBIA2300构建植物表达载体pC35MG.②将番茄果实特异性启动子E81.1插入pB35MG构建中间载体pB35E1MG,再将其中E35SE81.1/TGMG/NOS3'结构单元亚克隆入pCAMBIA2300构建植物表达载体pC35E1MG.③将番茄果实特异性启动子E82.2插入pB35MG构建中间载体pBE2MG,再将其中E82.2/TGMG/NOS3'结构单元亚克隆人pCAMBIA2300构建植物表达载体pCE2MG.测序鉴定pB35MG、pC35E1MG、pCE2MG中的TGMG序列.④pC35MG、pC35E1MG、pCE2MG转化根癌农杆菌LBA4404.结果重组质粒用酶切鉴定均得到预期片段,pB35MG、pC35E1MG、pCE2MG测序结果正确.结论成功构建TGMG中间载体pB35MG、pB35E1MG、pBE2MG,以及植物表达载体pC35MG、pC35E1MG、pCE2MG.并将3种植物表达载体导入根癌农杆菌.

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