TRPV6基因沉默对滋养细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨瞬时受体电位通道V亚家族6(TRPV6)基因沉默对人早孕期胎盘绒毛膜外滋养细胞株HTR-8/SVneo细胞增殖及凋亡的影响.方法 构建TRPV6小分子干扰RNA(siRNA)序列；体外培养HTR-8/SVneo细胞,进行转染,随机分为空白对照组(只加转染试剂)、阴性对照组(转染非特异的siRNA序列)及实验组(转染TRPV6-siRNA)；收集转染后24、48及72 h的各组细胞,应用逆转录(RT) PCR技术检测转染后不同时间点各组细胞中TRPV6 mRNA的表达水平；四甲基偶氮唑蓝比色法和流式细胞技术检测转染后不同时间点各组细胞增殖抑制率和细胞凋亡率.结果 siRNA序列有效地阻断了HTR-8/SVneo细胞中TRPV6基因的表达,转染24、48、72 h后,实验组TRPV6 mRNA的相对表达水平分别为0.72 ±0.02、0.54±0.02、0.29±0.01,同一时间点实验组与空白对照组及阴性对照组TRPV6 mRNA的相对表达水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.01)；细胞转染24、48、72 h后,实验组细胞增殖抑制率分别为(19.29 ±1.23)％、(32.12±1.35)％、(46.51 ±1.42)％,空白对照组分别为(2.12±0.03)％、(2.42±0.02)％、(3.13±0.04)％,阴性对照组分别为(2.37±0.01)％、(2.61±0.05)％、(2.93±0.03)％,各组不同时间点细胞增殖抑制率分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01)；实验组转染48 h时的细胞凋亡率为16.21％,与空白对照组(3.27％)和阴性对照组(5.34％)比较,差异也均有统计学意义(P＜0.05).结论 TRPV6基因沉默可以显著抑制人早孕胎盘绒毛膜外滋养细胞的增殖活性,并促进细胞凋亡.