钝齿棒杆菌天冬氨酸激酶基因的克隆和序列分析

运用PCR方法,从野生型钝齿棒杆菌株(Corynebacterium crenatum)AS1.542及具有AEC抗性的突变株CD945染色体上分别扩增出天冬氨酸激酶(AK)基因(ask),构建了重组质粒.核苷酸序列分析表明,C.crenatum AS1.542AK基因与C.crenatum CD945相比,第1199位的碱基由T变为C,引起酶蛋白β亚基第80位氨基酸从亮氨酸变成脯氨酸.该氨基酸的突变在蛋白结构上位于ACT结构域内,该区受赖氨酸调控.C.crenatum AS1.542的AK基因的编码区核苷酸序列与C.glutamicum ,C.flavum及B.lactofermentum相比,同源性分别为97.23%、97.55%和97.62%,酶蛋白氨基酸序列的同源性分别为99.76%、99.52%和99.76%.但在AK基因的启动子上游序列部分与其它棒杆菌相比有较大差异.