高山被孢霉ATCC16266Δ6-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中的表达

Sheng wu gong cheng xue bao = Chinese journal of biotechnology（2001）

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摘要

△6-脂肪酸脱氢酶是形成γ-亚麻酸的关键酶.从含有高山被孢霉△6-脂肪酸脱氢酶基因的重组质粒pT-MACL6中,酶切出1.4kb的目的片段,亚克隆到大肠杆菌和酿酒酵母的穿梭表达载体pYES2.0,在大肠杆菌中筛选到含有目的基因的重组质粒pYMAD6,用醋酸锂方法转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INCSc1中,在SC-Ura合成培养基中,选择得到酿酒酵母工程株YMAD6.在合适的培养基及培养条件下,加入外源底物亚油酸,经半乳糖诱导后,收集菌体.通过GC-MS对酵母工程株进行脂肪酸色谱分析,结果表明,产生了31.6%的γ-亚麻酸.这是迄今为止,国内外△6-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中表达量最高的报道.

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关键词

saccharomyces cerevisiae,gene,mortierella alpina

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