CD-14和Tool样受体在牙髓卟啉单胞菌脂多糖诱导成骨细胞白细胞介素6表达中的作用

目的 探讨CD-14和Tool样受体（Toll like receptors，TLR）在牙髓卟啉单胞菌（Porphyromonas endodontalis,Pe）脂多糖诱导小鼠成骨细胞白细胞介素6(IL-6)表达中的作用。方法用10 mg/L的Pe-脂多糖分别作用于小鼠成骨细胞MC3T3-E1不同时间，未加Pe-脂多糖的MC3T3-E1为空白对照组。反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验检测细胞IL-6基因和蛋白的表达，RT-PCR和流式细胞术检测细胞表面CD-14、TLR-2及TLR-4基因和蛋白的表达变化。抗小鼠CD-14、TLR-2及TLR-4抗体预处理细胞后，采用RT-PCR法检测Pe-脂多糖诱导细胞IL-6mRNA表达的变化。应用SPSS 11.0统计软件对结果进行单因素方差分析Dunnett-t检验。结果Pe-脂多糖作用于细胞后，与空白对照组比较细胞IL-6 mRNA和蛋白的表达明显增加，6h时IL-6表达[(36.534±0.574) ng/L]显著高于空白对照组[(11.696±0.672)ng/L)]，P＜O.01；空白对照组中CD-14和TLR-4 mRNA呈弱表达,CD-14和TLR-4的阳性细胞率分别为(39.038±3.131)％和( 11.438±0.385)％,加入Pe-脂多糖后CD-14和TLR-4 mRNA表达明显增加，CD-14和TLR-4的阳性细胞率分别增加至(62.407±1.800)％和(21.367±2.271)％，但TLR-2的表达未见明显变化；中和抗体实验证明CD-14或TLR-4抗体均可部分抑制细胞IL-6 mRNA的表达，TLR-2抗体则无此作用。结论Pe-脂多糖作用于成骨细胞MC3T3-E1诱导其炎症因子IL-6的产生依赖于CD-14和TLR-4受体，与TLR-2无关。