机械牵张损伤后的大鼠子宫韧带成纤维细胞对大鼠骨髓间充质干细胞定向分化的影响

目的 探讨与机械牵张损伤后的大鼠子宫韧带成纤维细胞间接共培养,对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)定向分化的影响.方法 利用细胞牵张损伤模型,对大鼠子官韧带成纤维细胞施以10%牵张变形(1 Hz,连续12 h单向机械牵张)后与大鼠BMSC间接共培养(牵张损伤组)3、6、12 d,采用SP法检测问接共培养后BMSC中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达水平(以平均灰度值表示);实时定量PCR技术检测间接共培养后BMSC中Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平(以其与磷酸甘油醛脱氢酶的比值表示),以BMSC自身共培养为对照组.结果 (1)蛋白表达情况:牵张损伤组细胞间接共培养3 d后,BMSC的Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达水平分别为82.4±3.4和76.8±2.5,与对照组(分别为80.2±2.6和74.6±1.1)比较,差异无统计学意义(P>0.05);细胞间接共培养6 d后,牵张损伤组BMSC的Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达水平分别为126.6±2.2和118.6±1.4,与对照组(分别为82.7±3.0和76.2±1.3)比较,差异有统计学意义(P<0.05);细胞间接共培养12 d后,牵张损伤组BMSC的Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达水平分别为135.3±3.4和128.7±2.6,与对照组(分别为86.6±1.3和81.8±1.4)比较,差异也有统计学意义(P<0.05).(2)mRNA表达情况:牵张损伤组细胞间接共培养3 d后,BMSC的Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平分别为2.10±0.20和1.20±0.30,与对照组(分别为2.01±0.12和1.13±0.21)比较,差异无统计学意义(P>0.05);细胞间接共培养6 d后,牵张损伤组BMSC的Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平分别为5.60±0.21和2.61±0.20,与对照组(分别为3.70±0.33和1.82±0.14)比较,差异有统计学意义(P<0.05);细胞间接共培养12 d后,牵张损伤组BMSC的Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平分别为5.91±0.31和2.92±0.23,与对照组(分别为4.04±0.21和2.04±0.13)比较,差异也有统计学意义(P<0.05).结论 机械牵张损伤后的大鼠子宫韧带成纤维细胞与BMSC间接共培养,可以促进BMSC的Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的合成,并诱导其分化为成纤维细胞.