阿霉素联合p21CIP1基因转染对人肝母细胞瘤细胞株HepG2增殖的影响

背景与目的:阿霉素类药物是治疗肝母细胞瘤的传统化疗药,但近年来其疗效不佳是困扰临床的一大问题,目前配合基因治疗提高阿霉素的疗效,是肝母细胞瘤治疗发展的新趋势.本实验研究阿霉素与p21基因转染联合对人肝母细胞瘤HepG2细胞增殖的影响.方法:实验分为空白对照组、单独加药组、pcDNA3转染对照组、p21转染组及p21转染+药物联合组.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测转染后HepG2细胞的生长趋势,联合处理后细胞增殖抑制状况;荧光定量PCR检测转染后p21 mRNA的表达情况,联合处理后survivin mRNA的水平变化.结果:转染后,p21转染组在第3 d和第4 d的生长速度明显慢于两对照组(P<0.01);经鉴定其有p21 mRNA表达量的增高,是空白对照组的155倍(P<0.05).以空白组为对照,在第3～5 d,联合组增殖抑制率明显高于单独加药组和p21转染组(第3d:43.92%vs.32.97%、35.77%,P<0.01;第4d:59.86%vs.39.35%、40.96%,P<0.01;第5d:51.81%vs.33.91%、10.68%,P<0.01);且1-4d内随联合用药时间的延长,抑制效应增强(r=0.91,P<0.05),并在第4d时较显著(Q=1.07).荧光定量PCR显示,联合组survivin mRNA水平显著低于p21转染组(P<0.01);与单独加药组比较,联合作用仅在48h时差异有统计学意义(P<0.01).结论:在一定时间范围内p21可增强阿霉素对HepG2细胞的增殖抑制作用,降低胞内survivin mRNA的表达.