豆类凝集素FRIL通过调控细胞周期分子的表达维持造血干/祖细胞的静息

目的 从细胞周期角度探讨豆类凝集素FRIL(Flt3 receptor-interacting lectin)体外维持造血干/祖细胞静息的分子机制.方法 以添加FRIL、Flt3配体(FL)和不添加因子的培养基分别培养脐血CD34+细胞,采用RT-PCR和Western blot法分别从mRNA和蛋白水平检测细胞周期相关分子的表达.结果 新分离的CD34+细胞中未检测到G0/G1期相关Cyclin和CDK蛋白的表达,培养3 d时FRIL组CyclinD3、CDK6蛋白相对表达量(分别为483±63、553±39)低于两个对照组(FI组:2437±52、3209±98;空白对照组:914±105、1497±55);培养3 d时FRIL组P27蛋白相对表达量(0.312±0.030)低于对照组(FL组:0.787±0.024;空白对照组:0.616±0.029),但表达较高的P53蛋白(FRIL组、FL组、空白对照组分别为4.476±0.159、0.581±0.099、2.167±0.114).FRIL组细胞周期正向调节因子的mRNA相对表达量低于或相当于FL组和空白对照组.结论 FRIL通过抑制参与造血细胞周期调控的CyclinD3和CDK6的表达,延迟了造血干/祖细胞的细胞周期,P27在FRIL抑制造血干/祖细胞分化中发挥了重要作用,P53也参与了FRIL对造血干/祖细胞的维持作用.