没食子儿茶素没食子酸酯拮抗百草枯诱导SK-N-SH细胞凋亡的机制

目的 探讨茶多酚中主要活性成分没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)拮抗百草枯诱导人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH细胞凋亡的作用机制.方法 培养SK-N-SH细胞并给予400 μmol·L-1百草枯作用72 h诱导细胞凋亡,建立细胞凋亡模型.实验分为6组:空白对照组、百草枯模型组、维生素E(10 μmol·L-1)组和EGCG(10、5、1 μmol·L-1)3个剂量组.药物处理细胞2 h后,加入百草枯,72 h后检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)的含量,罗丹明123染色及流式细胞术测线粒体膜电位,RT-PCR检测细胞bcl-2 mRNA与bax mRNA表达情况.结果 与空白对照组比较,百草枯模型组细胞SOD活性降低,MDA和ROS含量增加,线粒体膜电位下降,bcl-2 mRNA表达减弱,bax mRNA表达增强,bcl-2/bax比值降低(均P＜0.01).对百草枯损伤的SK-N-SH细胞,维生素E和EGCG可明显提高SOD活性,降低MDA和ROS的含量,恢复线粒体膜电位,增强bcl-2 mRNA表达,减弱bax mRNA表达,升高bcl-2/bax比值(P＜0.05或P＜0.01).结论 EGCG拮抗百草枯诱导SK-N-SH细胞凋亡的机制可能与提高细胞抗氧化能力、保护线粒体结构和功能的完整性、抑制线粒体凋亡基因过度表达有关.