人脂肪干细胞向内皮细胞的定向分化

目的 为解决血管组织工程种子细胞来源不足问题,分离和培养人脂肪干细胞(hADSCs),并在体外定向诱导hADSCs分化为内皮细胞.方法 利用胶原酶消化法和贴壁筛选法从人脂肪组织中分离、培养及扩增hADSCs;应用纤维粘连蛋白(FN)与富含多种生长因子的内皮细胞支持液EGM2-MV及高浓度血管内皮细胞生长因子(VEGFi6s)50 ng/ml,协同定向诱导hADSCs分化为内皮细胞,然后对其进行形态、表型及功能鉴定.结果 体外分离、培养出高度同源性的hADSCs,hADSCs定向内皮分化后免疫组化及RT-PCR结果显示,内皮特异性标志物CD31、CD34及血管内皮细胞生长因子受体(KDR)阳性表达,透射电镜下观察到内皮特异性结构怀布尔-帕拉德(Weibel-Palade)小体,内皮细胞功能性检测结果显示诱导后hADSCs能够吞噬Dil标记的乙酰化的低密度脂蛋白(Dil-Ac-LDL)及在基质胶(Matrigel)上形成小管样结构,成管数(18.9±1.203)、分支数(31.2±1.304)、结点数(16.9±1.183),与HUVEC组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 在体外可成功诱导hADSCs分化为内皮细胞.