孕酮对正常生育和不明原因不育男性精子细胞内游离Ca~(2+)浓度的影响

目的:比较正常生育男性和不明原因不育男性患者精子细胞内游离Ca~(2+)浓度([Ca~(2+)]_i)对孕酮(P)的反应性. 方法:选择10例不明原因不育男性患者和9例正常生育男性,用上游法分离活力良好的精子并于体外获能2 h,将获能后精子与8.85μmol/L钙荧光探针Fluo-3/AM避光孵育40 min负载,将负载后的精子悬液与等量20%明胶混匀以制动精子,然后在激光扫描共聚焦显微镜下动态观察单个精子头部的[Ca~(2+)]_i基础水平以及10μmol/L P刺激对[Ca~(2+)]_i的影响. 结果:不育组获能2 h后精子的[Ca~(2+)]_i基础水平显著低于生育组(P<0.01).生育组精子经10μmol/L P刺激后,产生快速而短暂的[Ca~(2+)]_i升高,[Ca~(2+)]_i峰值水平显著高于其基础水平(P<0.05);而不育组精子经P刺激后,[Ca~(2+)]_i仅有微弱增加,其峰值水平与基础水平相比无统计学差异(P>0.05).生育组由P激发的精子[Ca~(2+)]_i,峰值水平以及[Ca~(2+)]_i升高幅度(峰值水平与基础水平之差)均显著高于不育组(P<0.01). 结论:不明原因不育男性患者精子[Ca~(2+)]_i;对P的反应性降低,提示这些患者精子膜上负责Ca~(2+)内流的非基因型孕激素受体可能存在功能障碍.