非诺贝特与代谢物的HPLC测定及在大鼠小肠淋巴转运中的应用

目的 建立高效液相色谱法同时测定大鼠血浆和淋巴液中非诺贝特(fenofibrate,FEF)及代谢物非诺贝特酸(fenofibricacid,FEFA)的浓度,应用于大鼠在体内的FEF小肠淋巴转运研究.方法 建立麻醉大鼠肠系膜淋巴插管和颈静脉插管模型,经十二指肠内给予FEF混悬液30 mg·kg-1后收集血液和淋巴液样品.血浆和淋巴液样品经含内标物萘普生的蛋白沉淀剂直接沉淀蛋白后,采用HPLC测定.色谱柱为Calesil ODS柱(4.6 mm × 150 mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(pH3.2)(82:18),流速为1.0 ML·min-1,检测波长为286 nm.结果 FEFA,FEF和IS的保留时间为4.25、9.15和3.3 min;血浆中FEFA线性范围为0.2～50μg·mL-1,淋巴液中FEFA,FEF线性范围均为0.1～25μg·mL-1(r > 0.999);低、中、高3个质控浓度在血浆和淋巴液中的日内和日间精密度RSD均小于9%,准确度均在95%～110%,萃取回收率均大于84%.将HPLC应用于大鼠在体内的FEF小肠吸收研究,血浆中仅能检测FEFA,于(5.67±2.08)h达峰浓度为(13.29±2.17)μg·ML-1,淋巴液中能同时检测到FEFA和FEF,分别于(4.75±0.96),(3.75±1.26)h达峰浓度为(4.35±0.97),(0.51±0.13)μg·ML-1.结论 本实验建立的RP-HPLC-UV法专属性及重现性好,准确可靠,可用于大鼠血浆和琳巴液中FEF和FEFA的同时测定.FEF经小肠吸收后部分经肠系膜淋巴转运进入全身血液循环.