转染LKB1基因乳腺癌细胞与胚胎发育信号通路及cAMP/PKA通路的关系
Fudan University Journal of Medical Sciences(2011)
Abstract
目的 探讨抑癌基因LKB1与胚胎发育(Sonic Hedgehog,SHH)信号通路、cAMP/PKA信号通路之间的相互关系.方法 抑癌基因LKB1转染人乳腺癌细胞MDA-MB-231,分MDA-MB-231组(231组)和转染LKB1基因的MDA-MB-231(LKB1组)两组,每组分别采用0、5× 10-6、1×10-5、2× 10-5 mol/L等4种浓度的SHH信号通路抑制剂环靶明( cyclopamine)作用于细胞,各小组细胞分别用RT-PCR法和Western blot法检测SHH-信号通路相关基因SHH、Smo的mRNA表达水平和蛋白表达水平,用cAMP、PKA试剂盒检测cAMP、PKA数值水平.结果 LKB1组的细胞通过不同剂量环靶明抑制后,SHH信号通路相关基因SHH、Smo的mRNA和蛋白表达水平相应较231组明显抑制,且与环靶明剂量呈正相关,抑制效果在环靶明浓度为10 × 10-6mol/L时最明显,继续增加环靶明浓度到20 × 10-6mol/L,抑制效果保持不变.231组和LKB1组中细胞的PKA和cAMP数值均随环靶明浓度增加而增高,至10×10-6mol/L时达到最高,继续增加环靶明浓度到20×10- 6mol/L,两组中的PKA和cAMP数值保持不变.在相同环靶明浓度下,LKB1组中PKA和cAMP数值高于231组中相应数值.结论 抑癌基因LKB1协同环靶明抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的SHH信号通路的同时亦协同增加cAMP/PKA信号通路的表达,且在环靶明浓度为10× 10-6 mol/L时效果最明显;推测存在LKB1-SHH-cAMP/PKA通路.
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Key words
Breast cancer,CAMP/PKA signaling pathway,Lkb1 gene,Sonic hedgehog signaling pathway
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