载基因阳离子脂质体的制备与包封率测定

Chinese Journal of New Drugs(2011)

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摘要
目的:制备包封基因质粒的阳离子脂质体并考察其性质、测定包封率.方法:以DC-Chol和DOPE为材料,薄膜分散法制备阳离子脂质体,与可表达增强型绿色荧光蛋白的基因质粒结合并考察其转染性能,激光粒度分析仪测定阳离子脂质体和脂质复合物的粒径及Zeta电位;使用葡聚糖凝胶过滤法测定包封率,并对该法进行详细考察.结果:所制备的阳离子脂质体和脂质复合物的平均粒径分别为161.6和216.3 nm,Zeta电位分别为+22.2和+3.2 mV;基因质粒在0.1925 ~3.85 μg·mL-1浓度范围内线性良好,精密度高,与葡聚糖无吸附作用,柱回收率高,测得脂质复合物的包封率为89.94%.结论:采用该处方和工艺可成功制备质量良好、能有效转染细胞的阳离子脂质体载体,葡聚糖凝胶过滤法可准确测定其包封率,该法快速、简便、有效.
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关键词
Cationic liposomes,Entrapment efficiency,Plasmid DNA,Sephadex filtration,Vitro transfection
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