Development of a solid-phase extraction-spectrofluorimetric method for trace glutathione determination

On a developpe une methode simple et efficace d'extractoin spectrofluorimetrique en phase solide pour determiner le glutathion (GSH). On a utilise la sonde fluorescente N-(4,4-difluoro-5,7-dimethyl-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene-3-yl)methyl)iodoacetamide (BODIPY F1-C-1-1A) comme reactif pour obtenir des derives. La methode repose sur le fait que le BODIPY F1-C-1-1A donne une reaction selective avec le GSH conduisant a la formation du produit hautement fluorescent BODIPY F1-C-1-1A-GSH qui peut etre isole par extraction en phase solide sur colonne et soumis a une determination spectrofluorimetrique. On a etudie et optimise les variables qui affectent la performance analytique. Le graphique de calibration a l'aide du systeme de preconcentration du GSH est lineaire sur la plage de 1 a 200 nmol/L, avec une limite de detection de 0,05 nmol/L (rapport signal a bruit = 3). La deviation relative standard pour six determinations de GSH en duplicata, a un niveau de concentration de 100 nmol/L, est de 3,9 %. On a applique la methode a des echantillons d'eau et on a obtenu des taux de recuperations moyens variant de 87,5 % a 111,5 % pour les echantillons ensemences.