mPEG-PCL-g-PEI聚合物纳米粒介导的小干扰RNA递送

本文旨在合成小干扰核糖核酸(siRNA)递送载体聚合物聚乙二醇-聚己内酯-聚乙烯亚胺(mPEG-PCL-g-PEI),并探讨其体外siRNA递送性能.通过开环聚合反应制备二嵌段共聚物聚乙二醉-聚己内酯(mPEG-PCL-OH),将mPEG-PCL-OH的羟基末端依次化学转化为羟基(-COOH)和N-羟基琥珀酰亚胺(-NHS)生成mPEG-PCL-NHS,再将mPEG-PCL-NHS同枝化聚乙烯亚胺(PEI)反应生成三元共聚物mPEG-PCL-g-PEI.应用傅里叶变换红外光谱(FTIR)、核磁共振(NMR)和凝胶渗透色谱(GPC)对聚合物mPEG-PCL-g-PEI进行结构表征;通过复凝聚法制备mPEG-PCL-g-PEI/siRNA纳米粒,并测定其粒径和zeta电位;通过体外细胞MTT测试,比较mPEG-PCL-g-PEI/siRNA纳米粒和PEI/siRNA纳米粒的细胞毒性;通过体外细胞转染实验,考察不同N/P比的mPEG-PCL-g-PEI/siRNA纳米粒对萤火虫荧光素酶基因表达的抑制效率.结果表明,合成的三元聚合物(MPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k能压缩siRNA形成粒径为50～200 mn的纳米粒,其表面带有正电荷.MTT分析结果显示(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k/siRNA纳米粒的细胞毒性显著小于PEI10K/siRNA纳米粒(P< 0.05).当N/P比在50～150,萤火虫荧光素酶基因的表达显著下调(P<0.01).当N/P比为125时,萤火虫荧光素酶基因表达的抑制效率最大.聚合物mPEG-PCL-g-PEI能递送siRNA进入细胞,抑制靶基因表达,且细胞毒性较低,有望成为一种新型的siRNA递送载体.