离子对反相液相色谱同时测定家兔血浆中的外源性磷酸肌酸及其代谢产物肌酸

建立了离子对反相高效液相色谱法( IP-RP-HPLC)同时测定家兔血浆中外源性磷酸肌酸(PCr)及其代谢产物肌酸(Cr)的方法,用于研究外源性PCr在家兔体内的药代动力学.以含离子对试剂四丁基硫酸氢铵(TBA)的磷酸盐缓冲液-甲醇为流动相,在Kromasil-C18色谱柱上进行梯度洗脱.采用内标法定量、以基线扣除法计算外源性PCr和Cr的浓度.PCr和Cr的线性范围分别为10 ～7 500 mg/L和10～1 500 mg/L;日内和日间精密度均≤6.2％,准确度分别为99.7％ ～ 102.2％和96.5％～102.4％；萃取回收率均大于92％.静脉注射PCr后,血浆中PCr的消除为二室模型,消除半衰期为(20.4±2.7) min;表观分布容积为(0.179±0.037)L/kg；清除率为(0.019±0.002) L/(kg·min);静脉注射PCr后血浆中迅即出现降解产物Cr,其达峰时间为30 min;消除半衰期为(43.7±4.5) min.本方法的专属性强,准确度和精密度高,能特异性地测定家兔血浆中的PCr和Cr.实际应用结果表明,该方法完全符合PCr药代动力学生物分析方法学的要求.