微小RNA干扰Bcl-2相关抗凋亡基因2抑制蛋白酶体抑制剂对甲状腺癌细胞凋亡诱导作用的研究

目的:探讨微小RNA干扰 Bcl-2相关抗凋亡基因2(BAG2) 对蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡作用的影响.方法:选取人甲状腺未分化癌细胞系FRO,分别设培养液处理空白对照组、蛋白酶体抑制剂MG132处理组、特异性siBAG2组和随机序列核酸siRNA组;利用微小RNA干扰技术降低BAG2的表达;采用RT-PCR法、蛋白质印迹法分别检测各组细胞BAG2 mRNA及蛋白表达;采用分光光度法测定Caspases-3活性;采用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率.结果:与空白对照组相比,MG132显著增加FRO细胞系中BAG2基因表达水平(P<0.01),并呈时间依赖效应;与空白对照组和随机序列核酸siRNA组相比,siBAG2处理组中BAG2 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01),其凋亡率及Caspases-3活性显著降低, P<0.01.结论:蛋白酶体抑制剂能够上调甲状腺未分化癌细胞系FRO中BAG2基因的表达水平,siBAG2具有特异性降低BAG2基因表达的作用,同时抑制蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡作用.