杜仲对大鼠骨髓基质细胞骨桥蛋白和骨保护素表达的影响水提液与醇提液有区别吗?

背景:以往实验证实杜仲能促进骨髓基质细胞向成骨细胞分化,但对促进成骨分化的分子机制报道很少.目的;观察中药杜仲水,醇提取物对大鼠骨髓基质细胞骨桥蛋白和骨保护素表达的影响方法:盐杜仲2 g,分别加蒸馏水或甲醇至15 mL,室温振荡1 h,静置过夜后,15 000r/min离心10 min,弃沉淀.水浸上清不经处理即得水提取物;甲醇浸上清经真空浓缩,再加水至15 mL溶解剩余物后,得醇提取物水、醇提取物,用0.22 μm滤膜过滤后于-20℃保存.取2月龄SD大鼠6只,体外培养至第3代SD大鼠骨髓基质细胞进行杜仲水,醇提取物诱导,诱导物分为1×10~(-2),1 ×10~(-3),1×10~(-4)和1 ×10~(-5)4个稀释度:阴性对照组加入PBS;诱导培养6 d.以免疫细胞化学法测定诱导6 d的骨髓基质细胞骨桥蛋白和骨保护素表达.应用反转录一聚合酶链反应方法测定1×10~(-3),1×10~(-4)稀释度诱导3 d的骨髓基质细胞骨桥蛋白和骨保护素的基因表达.结果与结论:细胞免疫化学显示,杜仲水,醇提取物对大鼠骨髓基质细胞骨桥蛋白的表达均有显著的刺激作用,以1×10~(-4)的稀释度作用最强,且醇提取物的作用大于水提取物;骨保护素的表达却无显著变化.反转录-聚合酶链反应显示,水提取物对诱导3 d后大鼠骨髓基质细胞骨桥蛋白的基因表达量显著高于醇提取物,骨保护素未检测出表达.证实杜仲水,醇提取物诱导骨髓基质细胞成骨分化与刺激骨桥蛋白表达相关,与骨保护素无关;水提取物促进骨髓基质细胞骨桥蛋白表达早于醇提取物.