大鼠前列腺平滑肌细胞的培养及其电压依赖性钙通道的表达

目的 探讨电压依赖型T-型及L-型钙通道亚基在SD大鼠前列腺平滑肌细胞(SPSMCs)中的表达.方法 分离、培养和纯化大鼠前列腺平滑肌细胞,并利用免疫细胞化学的方法检测a.平滑肌肌动蛋白(a-smooth muscle actin,a-SMA)进行细胞鉴定;采用RT-PCR技术观察大鼠前列腺平滑肌细胞中钙离子通道不同亚基alC、alD、alG、alH mRNA的表达.结果 培养的细胞多呈长梭形,a-SMA免疫细胞化学染色为阳性,经传代纯化,纯度近100%.RT-PCR结果显示,可见L型钙通道alC、alD及T型钙通道alG的表达,未见alH的表达.结论 贴块法培养前列腺平滑肌细胞方法简便经济,可获得高纯度、状态良好的细胞,电压依赖型L-型钙通与T.型钙通道存在于原代培养的SPSMCs中,它们的变化可能改变前列腺半滑肌的收缩活性.