锌对大鼠骨髓间充质干细胞DNA和蛋白质含量及增殖周期的影响

Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research(2009)

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摘要
背景:锌通过直接和间接作用对DNA聚合酶和RNA聚合酶产生影响,在细胞的DNA复制、RNA转录、增殖、分化等活动中起重要作用.目的:探讨锌对大鼠骨髓间充质干细胞DNA和蛋白质含量及增殖周期的影响.设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2008-09/12在辽宁医学院完成.材料:清洁级1月龄SD大鼠7只,由辽宁医学院动物中心提供.方法:全骨髓法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,传至第3代时,对照组向细胞中加入含体积分数为15%胎牛血清的DMEM培养液,锌处理组向上述培养液中加入硫酸锌,使锌终浓度分别达到0.1,0.2,0.5,1.O,2.0,4.0,6.0 mg/L.胰酶消化后按5×107L-1密度接种,培养21d.主要观察指标:细胞表面抗原的表达,MTT法检测细胞活性,流式细胞仪测定细胞DNA含量、蛋白质含量和增殖周期.结果:第3代细胞表面抗原CD106呈阳性表达.锌对骨髓间充质干细胞活性的促进作用呈量效关系,0.2-4.0 mg/L锌处理组细胞活性显著高于对照组(P<0.01),尤以质量浓度为2.0mg/L时最为明显:当锌的质量浓度达6.0mg/L时,细胞活性明显降低(P<0.01).培养7,14,21 d与对照组比较,2.O mg/L锌处理组骨髓间充质干细胞DNA含量、蛋白质含量均显著升高(P<0.01);细胞增殖指数、S期和G2+M期细胞百分率均明显升高,G0/G1期细胞百分率则显著下降(P<0.01).结论:O.2~4.0 mg/L锌能促进大鼠骨髓间充质干细胞的增殖、DNA复制和蛋白质合成,且2.0 mg/L为最佳质最浓度.
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