刀额新对虾组织蛋白中变应原组分的分析与纯化

目的 分析和纯化刀额新对虾组织蛋白中的变应原组分,为进一步研制虾源性过敏反应疾病的诊断试剂和脱敏药物奠定基础.方法 刀额新对虾粗提蛋白经SDS-PAGE分离,用虾过敏患者血清,经Western blot分析其变应原组分.以DEAE-52离子交换层析纯化主要变应原组分,用虾过敏患者血清对纯化产物进行ELISA分析.结果 SDS-PAGE分析显示,刀额新对虾粗提蛋白约有20条可辨蛋白带,相对分子质量在12 100～105 600之间.Western blot分析显示,12份虾过敏患者血清与粗提蛋白均呈阳性反应.粗提蛋白有7条蛋白条带反应率高,其中相对分子质量为36 000、46 200、60 000和68 000的4条蛋白带与所有12份患者血清均呈阳性反应.经DEAE-52离子交换层析纯化后,ELISA结果 显示,变应原主要集中在70%盐析段0.1mol/L洗脱峰内.结论刀额新对虾组织蛋白中的相对分子质量为36 000、46 2 00、60 000和68 000的组分是其主要变应原.