纳米金/壳聚糖仿生功能支架对角质形成细胞贴壁及增殖的影响

背景:许多研究发现三维结构的纳米材料能促进细胞增殖.目的:构建一种新型纳米金,壳聚糖仿生功能支架,观察角质形成细胞在支架上的贴壁、增殖情况.设计、时间及地点:细胞观察性实验,于2006-05/2007-04在南通大学公共卫生学院进行.材料:1.0～2.0 d龄SD大鼠由南通大学实验动物中心提供,壳聚糖(脱乙酰度＞90%)由浙江省玉环县化工厂提供,氯金酸由上海试剂一厂提供.方法:用化学还原法制备纳米金胶,通过自组装技术将纳米金胶组装到壳聚糖膜表面,得到纳米金,壳聚糖膜仿生功能支架.将SD大鼠皮肤用2.5 g/L胰酶消化得到角质形成细胞.将角质形成细胞分别接种在纳米金/壳聚糖仿生功能支架、壳聚糖膜、空白培养板上,计算培养6,12,24 h后的贴壁率,用免疫组织化学和透射电子显微镜等手段对培养的角质形成细胞进行鉴定.主要观察指标:角质形成细胞存纳米金/壳聚糖膜上的的贴壁率;纳米金/壳聚糖膜上的角质形成细胞形态.结果:①6,12,24 h角质形成细胞在纳米金/壳聚糖仿生功能支架上的贴壁率分别为25.52%,40.34%,58.72%,12,24 h贴壁率明显高于其他两组.②免疫组织化学榆测结果显示培养的细胞绝大部分为角质形成细胞.③透射电子显微镜观察可以看到角质形成细胞呈圆形,核大,异染色质较多,胞浆内富含线粒体,细胞活力强.结论:纳米金/壳聚糖仿生功能支架能显著提高角质形成细胞的贴壁、生长.