睾丸内胰岛移植对CD4+CD25+调节性T细胞分布的影响

背景:CD4+CD25+调节性T细胞是维持机体免疫耐受的重要调控者,参与了多种移植免疫耐受的诱导.目的:拟观察小鼠睾丸内胰岛移植后CD4+CD25+调节性T细胞分布的特点.设计、时间及地点:观察对照动物实验,2007-04/2008-01在江西省实验动物中心完成.材料:成年Balb/c小鼠.方法:分离小鼠胰岛细胞,采用胰管内注射胶原酶水浴消化及Ficoll 400不连续密度梯度离心法纯化,以双硫腙染色,计算胰岛细胞纯度,以体外葡萄糖刺激胰岛素分泌试验判定胰岛细胞功能.将胰岛移植至小鼠睾丸或肾包膜下,每只移植300-400个胰岛.在胰岛移植24h后麻醉处死小鼠,取脾脏、睾丸及淋巴结,制成细胞悬液,免疫磁珠法分离CD4+CD25+T细胞,通过流式细胞仪分析计数.主要观察指标:胰岛细胞的纯度及功能,CD4+CD25+调节性T细胞的分布.结果:纯化后每只胰腺获得(478±53)个胰岛细胞,纯度为(81.5±12.3)%,纯化后细胞形态完好,活度大于90%.睾丸内胰岛移植时,睾九、淋巴结及脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞均显著增多(P＜0.05-0.01).结论:睾丸内胰岛移植能明显上调睾丸、淋巴结及脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量.